CoIP實驗步驟
免疫共沉淀技術流程圖
Co-IP-MS質譜分析
客戶案例(一)
蛋白-蛋白相互作用網絡圖
分子量檢測 蛋白質譜檢測 iTRAQ服務 靶向蛋白絕對定量
技術原理
免疫共沉淀(co-inmunoprecipitation,Co-IP)技術已經成為經典的檢測蛋白-蛋白間相互作用的測序技術,其基本原理是以細胞內源性靶蛋白為誘餌,將靶蛋白抗體與細胞總蛋白進行共孵育,促進免疫復合物的形成;
隨后加入能夠與抗體FC段結合的protein-A/G(預先結合固化在瓊脂小珠上),形成”結合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗體-proteinA/G小珠”復合物,純化該復合物凝膠電泳分離蛋白,應用Western blot或者質譜分析鑒定靶蛋白的結合蛋白。
基云優勢
免疫共沉淀與質譜結合,不僅能驗證已知蛋白的相互作用,而且還可以鑒定與目標蛋白互作的未知蛋白,以及通過這種互作蛋白可能所影響到的某一信號通路,為生物研究提供一個新方向,為科研人員提供全新的實驗思路。
基云生物CoIP實驗實施的優勢就在于在嚴格的質控標準下 ,為客戶提供真實、可靠的數據,富集到的相互作用蛋白經過生物信息分析后,有利于科研人員從信號通路、互作網絡等有據可依的基礎上挑選感興趣的互作蛋白作進一步的研究。
樣品要求
提供包含目標基因的表達質粒(提供測序圖譜)或基因的名稱、序列;
提供細胞系和細胞培養的詳細步驟;
提供相應抗體。
我們提供
提供免疫共沉淀X光片或者質譜鑒定數據;
提供具體試驗步驟及相關分析數據等;
結題報告將以電子或書面形式遞交到客戶手中;
后續技術支持。
CoIP聯合質譜客戶群體
