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          蛋白質組學

                

                膠條鑒定是指利用LC-ESI-MS/MS蛋白鑒定技術對膠條樣本(即SDS-PAGE樣本)、IP、co-IP(western blot)、Pull-down等純化溶液等中的復雜樣本進行生物質譜鑒定。
          膠條鑒定技術原理

                 電噴霧(ESI)技術是將待測分子溶解在溶劑中通過HPLC分離,以液相方式通過毛細管達到噴霧口,在噴霧口高壓電場作用下形成帶電荷的微滴,隨著微滴中的揮發性溶劑蒸發,微滴表面的電荷體密度隨半徑減少而增加,達到某一臨界點時,樣品以離子化的方式從液滴表面蒸發,進入質量分析器。電噴霧離子化方式容易形成多電荷離子,因此在較小的M/Z范圍內可檢測到大分子質量的分子;
                采用液相方式進樣,一般與液相色譜(LC)聯用,可以對復雜樣品進行質譜分析,根據樣品在色譜中不同的保留時間對其進行分離后鑒定,可以明顯提升質譜分析檢測的效率和精確度。

          膠條鑒定實驗流程
           

          應用領域
           
                   蛋白質測序或者多肽質譜鑒定
           
          膠條鑒定樣品要求
           
                   蛋白質溶液:濃度>0.1μg/μl,蛋白質總量 >5μg;

                               緩沖液不含去污劑NP40、Triton   X-100等

               SDS-PAGE條帶:考染、銀染(質譜兼容)條帶清晰可見;
          相關鏈接:  分子量檢測       蛋白質譜服務     Westerb blot    iTRAQ服務


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