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          蛋白質組學

                           label-free
          技術概述
                    蛋白質非標記定量技術(label-free)是通過液質聯用技術對蛋白質酶解肽段進行質譜分析,無需使用昂貴的穩定同位素標簽做內部標準,只需分析大規模鑒定蛋白質時所產生的質譜數據,比較不同樣品中相應肽段的信號強度,從而對肽段對應的蛋白質進行相對定量。與iTRAQ技術相比,Label-free的技術優勢就在于蛋白質不需要昂貴的同位素標簽進行標記,所需樣品總量少,耗費低。
          技術特征
                      1. 樣本非標記,操作簡單;
                   2. 易跟蹤蛋白豐度;
                   3 .能夠鑒別低豐度肽段;
                   4. 可以鑒定差異后再進行二級質譜蛋白鑒定;
                   5. 實驗重現性低

          項目實施
                 label free技術服務
                非標記定量蛋白質組學已成為越來越重要的質譜定量方法,按照其原理主要分為兩種:
                 Spectrum counts類的非標記定量方法:發展比較早,已經形成多種定量算法,但主要原理都是以MS2的鑒定結果為定量基礎,各種方法的差別在于后期算法在大規模數據上的修正。
                 另一種非標記定量方法的原理是以MS1為基礎,計算每個肽段的信號強度在LC-MS色譜上的面積積分。

                       label-free技術
                                                          差異蛋白基因
          (MF)分子功能分析
                      label free生信分析
                                                     Lalbel free技術數據(P
          A)通路分析
          應用領域
          • 疾病標志物篩選   
          • 作用機制研究   
          • 植物抗逆研究
          • 藥物作用靶點研究         
          • 特殊功能蛋白質篩選
          樣本要求
                 樣品類型                    樣品要求

                蛋白質提取物          濃度 >1μg/μl,蛋白質總量 >200μg
                組織樣品                 動物、微生物組織濕重>10mg;植物鮮嫩組織>100mg
                體液樣品                 血液體積>500μl
                細胞樣品                 細胞量>10的7次方


          相關鏈接:  分子量檢測       蛋白質譜服務     Westerb blot    iTRAQ服務


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